基于ITS序列和化学模式识别方法鉴定金蝉花及其混淆品独角龙

作者:何小翠; 万晶琼; 朱益灵; 魏渊; 崔恒林; 杨滨*; 欧阳臻*
来源:中国中药杂志, 2022, 47(02): 403-411.
DOI:10.19540/j.cnki.cjcmm.20211024.101

摘要

基于ITS序列对金蝉花与独角龙进行分子鉴定,并建立HPLC指纹图谱结合化学模式识别方法,鉴别金蝉花及其混淆品独角龙。分别提取10批金蝉花与5批独角龙的基因组DNA,通过PCR扩增ITS序列并测序,利用MEGA 7.0软件比较二者的稳定差异位点并构建系统发育树;采用HPLC建立金蝉花与独角龙指纹图谱,运用相似度评价、聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)和偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)对其进行化学模式识别研究。结果表明金蝉花为Cordyceps cicadae,独角龙为Toly-pocladium dujiaolongae,二者的基原不同,且金蝉花与混淆品独角龙的ITS序列上共有115个稳定差异位点,构建的系统发育树可以有效的区分二者;建立了18批金蝉花与5批独角龙的HPLC指纹图谱,CA、PCA和PLS-DA结果一致,均能很好地区分二者,表明金蝉花与独角龙在化学成分上存在较大的差异,且PLS-DA结果显示尿苷、鸟苷、腺苷和N6-(2-羟乙基)腺苷等6个成分是导致二者差异的主要标志性成分。ITS序列和HPLC指纹图谱结合化学模式识别方法均可以作为金蝉花与独角龙的鉴定和鉴别手段。

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