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摘要
本文旨在研究黄鳍金枪鱼（Thunnus albacares）碎肉中4种不同蛋白酶酶解物的3k Da超滤组分对RAW264.7细胞的免疫活性。以RAW264.7细胞为实验模型,采用噻唑蓝比色法检测细胞增殖活性,中性红吞噬实验检测细胞吞噬能力,Griess试剂检测细胞培养上清液中NO含量,并分析酶解物氨基酸组成和分子量分布。实验结果表明,胰蛋白酶酶解物在12.5～200μg·mL-1范围内无明显细胞毒性,能增强RAW264.7细胞吞噬能力,浓度为400μg·mL-1时达到最大值132.50%（P-1范围内能促进巨噬细胞NO释放（P<0.01）,且NO释放量与酶解液浓度存在一定的量效关系;胰蛋白酶酶解物中必需氨基酸（essential amino acid, EAA）含量最高,为51.09%,其碱性氨基酸组氨酸、赖氨酸和精氨酸的含量分别为11.59%、11.00%和6.90%,均高于其他蛋白酶酶解物,并且分子量小于1k Da的小肽含量高达97.48%。研究结果表明, 4种蛋白酶酶解物中,黄鳍金枪鱼碎肉胰蛋白酶酶解物的3k Da组分具有较明显的免疫活性,这为其作为免疫活性肽的开发利用提供了理论依据。
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