摘要

目的检测呼吸疾病患者肺内肺孢子菌基因阳性率,探讨肺孢子菌定植或感染的影响因素及其与呼吸系统疾病的相关性。方法设计3对特异性引物,构建检测肺孢子菌16SrRNA基因的LAMP反应体系。通过对大鼠感染模型的肺孢子菌基因检测,验证其敏感性和特异性;通过对临床呼吸疾病患者痰液样本肺孢子菌基因的检测,分析肺孢子菌感染或定殖与呼吸系统疾病的相关性及其影响因素。结果本研究建立的LAMP方法检测肺孢子菌16SrRNA基因的最低检测极限为50copies/mL;与念珠菌等8种呼吸道病原体不发生交叉反应。共收集和检测98例呼吸疾病患者痰标本,肺孢子菌基因总检出率为63.3%(62/98)。合并呼吸道感染者63例,非合并感染者35例,肺孢子菌基因阳性率分别为60.3%和75.0%,χ2检验两者差异有统计学意义。肺部影像学有改变者肺孢子菌基因检出率为72.5%,肺部影像学无改变者检出率为53.19%,χ2检验两者具有显著性差异。COPD和非COPD患者肺孢子菌基因检出率分别为53.2%和71.2%,χ2检验两者无显著性差异;COPD急性发作期和稳定期阳性率分别为66.8%和46.9%,χ2检验两者差异无统计学意义。CD4+T淋巴细胞数降低患者肺孢子菌基因检出率80.0%;CD4+T淋巴细胞数正常者的检出率为60.27%,χ2检验两者差异具有统计学意义。1,3-β-D-葡聚糖血含量升高和含量正常患者的肺孢子菌基因检测结果显示,χ2检验两者差异无统计学意义。结论呼吸疾病患者中肺孢子菌基因检出率较高。两者是否有直接的因果关系尚需进一步研究。合并其他细菌感染者肺孢子菌基因阳性率较低,其机制有待于进一步研究。CD4+T细胞数降低者肺孢子菌基因阳性率升高,符合肺孢子菌为机会感染的特点。