葡萄根瘤蚜TaqMan-MGB实时荧光定量检测方法的研究

作者：郭庆; 王忠跃; 孔繁芳; 武艳霞

来源：植物保护, 2012, (02): 108-113.

• 葡萄根瘤蚜
• TaqMan-MGB
• 实时荧光定量PCR grape phylloxera
• real-time PCR

为建立葡萄根瘤蚜实时荧光定量PCR的检测方法,参考Karen Herbert等设计的特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,构建以标准阳性质粒作为标准品制作标准曲线,并经优化反应条件,建立葡萄根瘤蚜的实时荧光PCR绝对定量检测方法,进行敏感性和重复性试验,并对受葡萄根瘤蚜为害的葡萄根际土壤进行初步定性检测。结果表明:该方法的灵敏度可达1.625拷贝/μL,3次重复检测的变异系数均小于5%。提取0.25g含有10头葡萄根瘤蚜若虫土壤的DNA,并将其梯度稀释,用建立的荧光定量PCR进行检测,将DNA稀释103倍后,仍能检测出阳性结果。对受害葡萄根际土壤检测结果为阳性。葡萄根瘤蚜TaqMan-MG...

• 单位
  中国农业科学院植物保护研究所; 植物病虫害生物学国家重点实验室