微量酶标夹心杂交法定量检测人iNOS-mRNA

作者：许艳芳; 吕建新

来源：中国病理生理杂志, 2004, (10): 1950-1952.

DOI：10.3321/j.issn:1000-4718.2004.10.053

• 酶联夹心杂交
• 逆转录聚合酶链反应
• 一氧化氮合酶

目的:建立一种高灵敏度、高特异性、精确、简便的微孔板酶联夹心杂交技术,对人iNOS-mRNA进行定量检测.方法: 设计两条特异探针,其中一条为捕获探针,5'端连接氨基,能与微孔板表面的NOS 基团共价结合,"竖直"地包被在微孔中,另一个为检测探针,3'端带有生物素标记.用脂多糖(LPS)刺激人外周血单个核细胞24 h后,提取巨噬细胞总RNA,进行RT-PCR扩增,PCR产物热变性后加入到已包被

• 单位
  温州医学院; 公共卫生学院