摘要

目的:探究骨痹合剂对膝关节骨性关节炎(KOA)模型鼠软骨细胞PI3K/AKT信号通路的影响。方法:体外培养小鼠KOA软骨细胞凋亡模型,予骨痹合剂含药血清进行干预,通过MTT检测细胞生长情况,运用免疫荧光染色、RT-PCR、Western Blot法检测软骨细胞Bad、Caspase-3、Caspase-9、NF-κB蛋白水平的表达。结果:与5%和20%含药血清浓度比较,10%含药血清更加促进细胞增殖;与第4、6、8天比较,第2天的时间点各组增殖变化最为明显。与正常对照组比较,KOA模型组软骨细胞Bad、Caspase-3、Caspase-9、NF-κB蛋白表达上调,mRNA表达显著上调(P<0.01);与KOA模型组比较,KOA+骨痹合剂组软骨细胞Bad、Caspase-3、Caspase-9、NF-κB蛋白表达下调,Bad、NF-κB mRNA表达显著下调(P<0.05,P<0.01)。与正常对照组比较,KOA模型组软骨细胞PI3K、AKT、mTOR蛋白表达均显著上调(P<0.05);与KOA模型组比较,KOA+骨痹合剂组软骨细胞PI3K、mTOR蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论:骨痹合剂能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,增加软骨细胞的自噬能力,抑制Bad、Caspase-3、Caspase-9、NF-κB相关蛋白及基因的表达,从而减少软骨细胞的凋亡。