基于miR-125a-3p/IL-23R/Th17轴探讨补中益气汤含药血清对AIT小鼠作用的研究

作者：杨潇; 宋囡; 曹慧敏; 刘子玉; 王智民; 高天舒^*

来源：时珍国医国药, 2020, 31(12): 2865-2868.

• 补气健脾
• 自身免疫性甲状腺炎
• Th17细胞
• miRNA-125a-3p
• IL-23R

目的探讨补中益气汤含药血清通过干预miR-125a-3p/IL-23R途径调控Th17细胞改善AIT的分子机制。方法选雌性8周龄NOD.H-2h4小鼠120只,按体重分层随机分组分为正常组(NG)、模型组(MG)、西药组(SeG)、补中益气汤高剂量组[BG-1,19.00g/(kg·d)]、中剂量组[BG-2,9.56g/(kg·d)]、低剂量组[BG-3,4.78g/(kg·d)]6组,每组20只。NG组饲以蒸馏水,其余各组饲以含0.05%碘化钠水,8周后成模,再予补中益气汤8周后麻醉处死小鼠、取样。采用细胞免疫磁珠(MACS)阴性分选AIT小鼠脾脏单细胞悬液CD4+T细胞,构建体外Th17细胞诱导体系,5天后检测Th17细胞诱导率,鉴定Th17细胞。另选取60只昆明小鼠随机分为正常组(NG)、模型组(MG)、西药组(SeG)、补中益气汤高、中、低剂量组(YG-1、YG-2、YG-3)6组,制备补中益气汤含药血清,采用MTT比色法筛选有效浓度、有效时间。将各组含药血清加入Th17细胞诱导体系中。采用流式细胞术方法检测各组血清Th17细胞比例,RT-PCR方法检测miR-125a-3p表达情况,Western Blot方法测定IL-23R蛋白表达。结果 MTT检测细胞增殖情况结果显示24h的10%含药血清对细胞的抑制率最低(P<0.05)。与NG组比较,MG组miR-125a-3p呈低表达(P<0.01);与MG组比较,SeG组、YG-2组、YG-3组miR-125a-3p相对表达量显著上调(P<0.01)。与NG组比较,MG组IL-23R呈高表达(P<0.01);与MG组比较,各给药组IL-23R蛋白相对表达量均下调(P<0.05),其中SeG组、YG-2、YG-3组IL-23R蛋白相对表达量下调更为显著(P<0.01)。结论补中益气汤调控Th17细胞改善AIT疾病免疫失常机制可能与miR-125a-3p/IL-23R有关。

• 单位
  辽宁中医药大学附属医院; 辽宁中医药大学; 辽宁省中医药研究院