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摘要
目的观察高三酰甘油血症(HTG)性急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠腺泡细胞自噬的变化,探讨高脂因素对自噬及AP病情的影响。方法 40只SD大鼠按数字表法随机分为对照组、ANP组、高脂血症组(HL组)、高脂血症性ANP组(HANP组)。对照组及ANP组大鼠先用正常饲料喂养2周,HL组及HANP组大鼠先用高脂饲料喂养2周,取血后,ANP组及HANP组大鼠采用胰胆管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠方法制备ANP模型,对照组及HL组大鼠腹腔内注射等容积生理盐水。造模后48 h处死大鼠,取血测三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及淀粉酶水平;取胰腺组织常规行病理检查并评分;透射电镜下观察细胞内超微结构改变,计算自噬体及自噬溶酶体数量;蛋白质印迹法检测胰腺组织自噬相关蛋白LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、p62、LAMP-2表达。结果高脂饮食2周后HL组、HANP组大鼠血清TG和TC水平显著高于对照组和ANP组;HANP组和ANP组血淀粉酶水平显著高于对照组和HL组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。透射电镜下见ANP组自噬小体数量显著高于其他3组,差异均有统计学意义(P值均<0.05);相对于ANP组HANP组腺泡细胞自噬活性被抑制。与对照组比较,ANP组胰腺组织LC3Ⅱ/Ⅰ比值及p62蛋白表达显著增加(2.11±0.03比1.70±0.08,9 420±624比4 973±577),LAMP-2蛋白表达下降(20 533±578比23 231±1 155);与ANP组比较,HANP组LC3Ⅱ/Ⅰ比值、p62蛋白表达显著下降(1.22±0.07比2.11±0.03,7 882±83比9 420±624),差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论高脂血症能加重AP的病理损伤,其机制可能与自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62表达下降,自噬体数量减少有关。
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