人可诱导的共刺激分子转基因细胞的构建及其对B细胞产生抗体的影响

作者：刘彤; 王凤鸣; 孙静; 张学光

来源：苏州大学学报(医学版), 2010, (03): 457-460+469.

• 可诱导的共刺激分子
• 逆转录病毒
• 稳定表达
• 基因转染 inducible co-stimulator
• retrovirus
• expression
• gene transfection

目的构建含人可诱导共刺激分子(ICOS)基因的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达人ICOS基因的L929细胞株,并初步研究ICOS对B细胞产生抗体的影响。方法采用RT-PCR方法从扁桃体激活的T细胞总RNA中扩增出ICOS cDNA,双酶切装入逆转录病毒载体pGEZ-Term,与辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72h后,经Zeocin筛选出稳定表达ICOS分子的L929细胞株;采用RT-PCR和流式细胞仪分析ICOS的分子表达,ELISA法研究ICOS信号对B细胞体外产生抗体的作用。结果成功地构建了含ICOS基因的重组逆转录病毒载体;筛选获得能稳定高表达人...

• 单位
  苏州农业职业技术学院; 苏州大学