成骨不全症患者 COL1A1/2致病突变谱和基因诊断研究

作者：赵秀丽; 肖继芳; 汪涵; 任秀智; 高劲松; 吴易阳; 卢超霞; 张学^*

来源：中华医学杂志, 2015, 95(43): 3484-3489.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2015.43.002

• 致密成骨不全症
• COL1A1基因
• COL1A2基因
• 基因诊断

目的在成骨不全症(OI)患者中鉴定Ⅰ型胶原基因(COL1A1和COL1A2)致病突变, 构建中国人OI致病基因突变谱, 并在此基础上完成OI高危胎儿的产前基因诊断。方法应用酚/氯仿法提取先证者及家系成员外周血基因组DNA, 联合应用聚合酶链反应(PCR)- Sanger DNA测序和靶向高通量测序技术对200例OI先证者进行COL1A1/2编码区及外显子/内含子衔接区的DNA序列分析;采用PCR-高分辨熔解曲线(HRM)技术对先证者及其家系成员进行突变验证;通过PCR-测序对散发病例的父母样本进行突变检测, 进而确定突变来源;联合应用PCR-测序和微卫星标记等位基因分析的方法进行胎儿产前基因诊断。结果在158例先证者中, 发现COL1A1/2基因致病突变125种, 包含COL1A1突变74种(91例), COL1A2突变51种(67例), 阳性检出率79%(158/200);发现新突变63种, 包括33种COL1A1突变和30种COL1A2突变。在上述125种COL1A1/2基因突变中, 13种突变分别在2例以上先证者中重复出现(其中6种突变重复出现4次以上), 合计检出46次, 检出率为29.11%(46/158);完成产前基因诊断74例, 其中包括患儿40例, 正常胎儿34例。结论建立基于Sanger DNA测序、靶向高通量测序和PCR-高分辨熔解曲线分析技术的OI基因诊断平台。在中国人群中, 构建了OI相关COL1A1/2基因致病突变谱, 并在此基础上完成大样本OI患者和高危胎儿的基因诊断。

• 单位
  北京协和医学院; 中国医学科学院基础医学研究所; 天津市武清区人民医院; 北京协和医院