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摘要
木薯细菌性枯萎病（CBB）是由地毯草黄单胞木薯萎蔫致病变种（Xam）引起的木薯重要病害，影响木薯产量，我国主栽的木薯品种均不抗Xam。Xam分泌的TAL20效应蛋白可结合木薯MeSWEET10a基因启动子的EBE区，激活该基因表达，促进糖类运输至Xam侵染的部位，为病菌的繁殖提供碳水化合物。本研究利用在线软件CRISPR-Pv2.0设计了EBE区的基因编辑靶点，构建CRISPR/Cas9基因编辑质粒pCAMBIA1301-Cas9-EBE-sgRNA。将重组质粒转化LBA4404根癌农杆菌，利用农杆菌介导法侵染木薯脆性胚性愈伤组织。提取侵染和未侵染的木薯脆性胚性愈伤组织DNA，PCR扩增靶点EBE区及潜在的脱靶位点，并进行Sanger测序分析编辑效果。结果发现EBE区被成功编辑，且没有脱靶现象。本研究有助于进一步获得MeSWEET10a基因启动子EBE区域的木薯突变体，增强木薯抗细菌性枯萎病的能力。
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