摘要
目的探讨臭氧治疗对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)表达的影响及其相关机制。方法雄性SD大鼠72只,其中正常对照组(N组)18只,余54只采用高脂高糖饮食联合链脲佐菌素腹腔注射法制作糖尿病大鼠模型,成功造模52只(成模率90%),随机分为3组:糖尿病模型组(D组,17只)无干预;氧气干预组(D+O2组,17只)给予氧气灌肠,每周3次;臭氧治疗组(D+O3组,18只)给予臭氧灌肠,每周3次。1个月后,麻醉下摘除眼球,TUNEL法检测细胞凋亡,并计算凋亡指数(apoptotic index,AI);荧光定量聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测VEGF mRNA和PEDF mRNA表达。结果 TUNEL法检测结果显示:凋亡细胞主要表达在视网膜神经节细胞层、内核层和血管内皮细胞层。N组、D组、D+O2组、D+O3组AI值分别为:1.97±0.53、34.43±5.56、34.68±5.80、19.22±3.30,各组间差异有统计学意义(F=89.070,P=0.000)。进一步两两比较结果显示:N组与D组、D+O2组、D+O3组间以及D+O3组与D组、D+O2组间差异均有统计学意义(均为P=0.000)。RT-PCR检测结果显示:N组、D组、D+O2组、D+O3组VEGF mRNA相对表达量分别为:4.22±1.18、11.60±3.42、10.75±2.81、7.40±2.13,各组间差异有统计学意义(F=23.923,P=0.000)。进一步两两比较结果显示:D组、D+O2组、D+O3组大鼠视网膜中VEGF mRNA的表达量明显高于N组,差异均有统计学意义(均为P=0.000);D+O3组VEGF mRNA的表达量低于D组和D+O2组,差异均有统计学意义(均为P=0.000)。RT-PCR检测结果显示:N组、D组、D+O2组、D+O3组PEDF mRNA相对表达量分别为:0.22±0.12、0.13±0.08、0.12±0.07、0.19±0.09,各组间差异无统计学意义(F=2.803,P=0.053)。进一步两两比较结果显示:N组与D组、D+O2组比较差异均有统计学意义(P=0.018、P=0.029),余组间比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论臭氧治疗可以减少糖尿病早期视网膜细胞凋亡,减少VEGF分泌,可能同时对PEDF有保护作用,对早期的糖尿病视网膜病变病程的发展可能有延缓的作用。
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单位新疆医科大学第一附属医院