木聚糖酶和纤维素酶多酶嵌合体的构建

作者：伏晓丽; 杨明明^*

来源：家畜生态学报, 2019, 40(04): 15-70.

• 脚手架蛋白
• 重组酶
• 纤维素酶多酶嵌合体

为探究木聚糖酶和纤维素酶形成的多酶嵌合体降解纤维素的效果,此研究设计了2个含有不同来源锚定域的重组木聚糖酶基因和重组纤维素酶基因,并设计了含有2个不同来源的粘附域和纤维素结合域的脚手架蛋白基因,体外构建了大肠杆菌E.coil BL21(DE3)表达载体,表达纯化了脚手架蛋白、重组木聚糖酶和纤维素酶。同时,体外组装三种元件形成多酶嵌合体,以微晶粉末纤维素为底物检测其降解纤维素的效率。结果显示,纯化所得的脚手架蛋白Scaf、重组木聚糖酶Xyn10B和纤维素酶Cel48F可在体外组装形成多酶嵌合体,该多酶嵌合体酶活(0.107±0.013 U/mL)显著高于游离酶混合物的酶活(0.084±0.001 U/mL)(P<0.05)。试验表明木聚糖酶Xyn10B和纤维素酶Cel48F可与脚手架蛋白Scaf体外组装形成多酶嵌合体,并可实现对纤维素的高效降解。

• 单位
  动物科技学院; 西北农林科技大学