人血小板膜糖蛋白基因终止突变c．1476G>A的体外表达研究

作者：刘瑛; 许先国; 陈舒; 洪小珍; 陶苏丹; 何吉; 朱发明; 吕杭军

来源：中华医学遗传学杂志, 2016, (01): 17-21.

• ITGB3基因
• 血小板膜糖蛋白Ⅲa
• 终止突变
• 体外表达 ITGB3 gene
• Glycoprotein Ⅲa
• Nonsense mutation
• In vitro expression system

目的对ITGB3基因新的终止突变c.1476G>A进行体外表达研究,以阐明其功能。方法应用体外定点诱变技术构建突变型ITGB3 c.1476G>A cDNA的真核表达载体,转化感受态细胞,提取质粒后测序验证。采用非脂质体介导重组质粒转染中国仓鼠卵巢癌细胞株(Chinese hamster ovarian cancer, CHO)细胞,经G418筛选获取稳定表达细胞株。采用实时荧光定量PCR、Western印迹和流式细胞术分别检测CHO稳定表达株ITGB3基因的mRNA表达和血小板膜糖蛋白Ⅲa(glycoprotein Ⅲa, GPⅢa)糖蛋白水平。结果成功构建野生型和突变型ITGB...

• 单位
  浙江省血液中心