新城疫病毒Mukteswar株反向遗传平台的建立

作者：魏家阳; 李丽; 王国康; 徐英英; 曾哲; 罗青平; 邵华斌; 温国元; 商雨; 潘兹书

来源：动物医学进展, 2023, 44(02): 30-35.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2023.02.026

• 新城疫病毒
• Mukteswar株
• 反向遗传操作系统

为了建立新城疫疫苗株Mukteswar株的反向遗传操作系统，根据Mukteswar株的基因序列设计了9对引物，扩增获得基因组片段，通过Overlap PCR和In-Fusion无缝克隆的技术，将9个片段拼接和插入至pACNR-T7中，获得了Mukteswar株全长cDNA克隆质粒pAC-Mukteswar。将其和3个辅助质粒(pVAX-NP、pVAX-P和pcDNA-L)共转染至预先感染了痘病毒vTF7-3的BHK-21细胞，成功拯救出重组病毒rMukteswar。对rMukteswar的生长曲线、最小致死剂量的平均致死时间(MDT)等生物学特性进行测定，结果显示rMukteswar具有和野生株相似的增殖特性和毒力。成功建立了新城疫疫苗株Mukteswar的反向遗传操作系统，为研发高效率表达外源病原体蛋白的新城疫载体疫苗奠定了基础。

• 单位
  湖北省农业科学院畜牧兽医研究所