大黄素介导IRX5抑制脂质新生相关因子减少游离脂肪酸诱导的肝细胞脂滴蓄积

作者：黄昶煜东; 朱丽英; 李程程; 许永劼; 杨婷婷; 韦思佳; 李兴; 潘卫^*

来源：现代预防医学, 2023, 50(12): 2227-2232.

DOI：10.20043/j.cnki.MPM.202212073

• IRX5
• 非酒精性脂肪肝
• 大黄素
• 脂肪酸代谢

目的 研究大黄素减少非酒精性脂肪肝病细胞模型脂滴蓄积的可能机制。方法 GEO数据库比较人肝组织中伊洛魁族同源盒基因5(Iroquois homeobox 5,IRX5)基因的mRNA表达量；4周龄db/m小鼠与db/db小鼠经12周维持饲料饲养后取肝组织，H&E实验观察小鼠肝组织病变；Western Blot实验和免疫组化实验观察小鼠肝组织IRX5表达量；大黄素干预游离脂肪酸诱导的HepG2非酒精性脂肪肝细胞模型，油红O染色观察细胞脂滴蓄积程度，并使用Image-Pro Plus 6.0软件计算阳性面积比；Western Blot实验检测HepG2细胞IRX5,固醇调节元件结合转录因子1(Sterol Regulatory Element Binding Transcription Factor 1,SREBF-1),脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthase, FASN),乙酰辅酶A羧化酶1(Acetyl-CoA Carboxylase 1 Antibody, ACC1)的表达；肝细胞过表达IRX5的同时大黄素处理，油红O染色观察细胞脂滴蓄积程度，Image-Pro Plus 6.0软件计算阳性面积比，Western Blot实验检测IRX5及SREBF-1,FASN,ACC1表达量。结果 人脂肪肝组织中IRX5基因的mRNA表达量高于健康肝组织(Z=-2.36,P<0.05);12周后，db/db小鼠出现明显肝脂肪空泡样变，伴随IRX5表达量升高(t=-8.17,P<0.05);大黄素干预后，脂肪酸诱导的HepG2细胞脂滴蓄积下降(d-BSA对照培养基状态下t=45.69,P<0.05;400μM油酸培养基状态下t=16.38,P<0.05;500μM游离脂肪酸培养基状态下t=45.33,P<0.05;),下调了IRX5及脂质新生相关因子SREBF-1,FASN,ACC1(使用40μM大黄素干预时，对于SREBF-1:t=0.26,P=0.807,对于FASN:t=5.73,P<0.05,对于ACC1:t=13.62,P<0.05;使用60μM大黄素干预时，SREBF-1:t=4.07,P<0.05,对于FASN:t=14.49,P<0.05,对于ACC1:t=33.34,P<0.05;使用80μM大黄素干预时，SREBF-1:t=16.75,P<0.05,对于FASN:t=23.14,P<0.05,对于ACC1:t=41.49,P<0.05);而过表达IRX5部分逆转了大黄素的降脂及大黄素对脂质新生相关因子的抑制作用。结论 IRX5在脂肪肝组织中表达增高，大黄素可能通过抑制IRX5蛋白水平，下调脂质新生相关因子表达，减少游离脂肪酸诱导的脂肪肝细胞模型脂滴蓄积。

• 单位
  贵州中医药大学; 贵州医科大学