鸡传染性法氏囊病病毒Gt株VP5基因缺失株感染性克隆的构建

作者：秦立廷; 祁小乐; 高玉龙; 高宏雷; 步志高; 王笑梅

来源：微生物学报, 2008, (12): 1666-1670.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2008.12.015

• 传染性法氏囊病病毒
• VP5
• 感染性克隆
• 重组病毒 infectious bursal disease virus
• viral protein 5
• infectious clone
• virus rescue

传染性法氏囊病病毒(IBDV)是双链,双节段RNA病毒,其基因组由A、B两个节段组成,编码结构蛋白VP1-VP4和非结构蛋白VP5。【目的】利用反向遗传操作构建拯救VP5基因缺失重组IBDV。【方法】利用体外定点突变技术,缺失IBDV Gt株VP5基因,通过多重PCR在基因组两端分别引入锤头状核酶序列(HamRz)和丁肝病毒核酶序列(HdvRz)。将带有核酶序列的IBDV基因组插入载体pCAGG的β肌动蛋白启动子下游,构建了IBDV感染性克隆pCAGGmGtAΔVP5HRT,将该感染性克隆与pCAGGmGtBHRT共转染DFⅠ细胞。【结果】RT-PCR和间接免疫荧光均显示获得重组病毒,将其命名...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室