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摘要
目的探讨大麻素2型受体激动剂JWH133对肺纤维化小鼠的保护作用。方法选24只C57BL/6J雄性小鼠按随机数字法分为对照组、模型组、JWH133干预组、JWH133+大麻素2型受体拮抗剂AM630拮抗组, 每组6只。气管滴注博来霉素(5 mg/kg)制作小鼠肺纤维化模型, 造模后第1天起, 对照组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液0.1 ml, 模型组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液0.1 ml, JWH133干预组小鼠腹腔注射JWH133(2.5 mg/kg, 溶于生理盐水中)0.1 ml, JWH133+AM630拮抗组小鼠腹腔注射JWH133(2.5 mg/kg)和AM630(2.5 mg/kg)0.1 ml, 28 d后处死所有小鼠, 取肺组织, 病理观察肺组织改变, 并进行肺泡炎评分和Ashcroft评分, 采用免疫组化测4组小鼠肺组织Ⅰ型胶原含量, 酶联免疫吸附测定(ELISA)测4组小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平, 测4组小鼠肺组织中羟脯氨酸含量, Western-blot测4组小鼠肺组织中Ⅲ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)、磷酸化核糖体S6激酶1(P-p90RSK)蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应测4组小鼠肺组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA表达水平。结果与对照组比, 模型组小鼠肺组织病理改变加重, 肺泡炎评分升高[(3.833±0.408)分比(0.833±0.408)分, P<0.05], Ashcroft评分升高[(7.333±0.516)分比(2.000±0.633)分, P<0.05], Ⅰ型胶原吸光度值升高(0.065±0.008 比 0.018±0.006, P<0.05), 炎性细胞浸润加重, 羟脯氨酸含量升高[(1.551±0.051)μg/mg 比(0.974±0.060)μg/mg, P<0.05];与模型组比, JWH133干预组小鼠肺组织病理改变减轻, 肺泡炎评分降低[(1.833±0.408)分, P<0.05], Ashcroft评分降低[(4.167±0.753)分, P<0.05], Ⅰ型胶原吸光度值降低(0.032±0.004, P<0.05), 炎性细胞浸润减轻, 羟脯氨酸含量下降[(1.148±0.055)μg/mg, P<0.05];与JWH133干预组比, JWH133+AM630拮抗组小鼠肺组织病理改变加重, 肺泡炎评分和Ashcroft评分升高, Ⅰ型胶原吸光度值升高, 炎性细胞浸润加重, 羟脯氨酸含量升高。与对照组比, 模型组小鼠肺组织α-SMA、Ⅲ型胶原、P-ERK1/2、P-p90RSK蛋白表达升高, Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA表达升高;与模型组比, JWH133干预组α-SMA(相对表达量 0.60±0.17 比 1.34±0.19, P<0.05)、Ⅲ型胶原(相对表达量 0.52±0.09 比 1.35±0.14, P<0.05)、P-ERK1/2(相对表达量 0.32±0.11 比 1.14±0.14, P<0.05)、P-p90RSK(相对表达量 0.43±0.14 比 1.15±0.07, P<0.05)蛋白表达下降;Ⅰ型胶原(相对表达量2.190±0.362 比 5.078±0.792, P<0.05)、Ⅲ型胶原(相对表达量1.750±0.290 比 4.935±0.456, P<0.05)、α-SMA(相对表达量1.588±0.060 比 5.192±0.506, P<0.05)mRNA表达降低;与JWH133干预组比, JWH133+AM630拮抗组小鼠肺组织α-SMA、Ⅲ型胶原、P-ERK1/2、P-p90RSK蛋白表达升高, Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA表达升高。结论大麻素2型受体激动剂JWH133可抑制小鼠肺组织炎症, 通过改善细胞外基质沉积减轻肺纤维化, 其机制可能与抑制ERK1/2-RSK1信号通路有关。
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单位贵阳市第一人民医院; 贵州医科大学
