肠道病毒71型SHZH03株VP1基因在毕赤酵母中的表达

作者:周世力; 李琳琳; 何雅青
来源:华中师范大学学报(自然科学版), 2007, 41(2): 259-262.
DOI:10.3321/j.issn:1000-1190.2007.02.022

摘要

利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增得到肠道病毒71型(EV71SHZH03)外壳蛋白VP1基因,经序列测定证实后,构建重组表达质粒VP1/pPIC9K,转化Pichia pastoris 酵母宿主菌Gs115,以Myc-Tag多克隆抗体作为一抗,利用双层滤膜法筛选酵母转化子.甲醇诱导表达.SDS-PAGE分析显示:表达产物的分子量约为30000,与天然VP1大小一致,ELISA实验表明,表达上清液可与EV71患者急性感染期血清呈阳性反应,表明重组蛋白VP1具有免疫原性.

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