自噬在草酸诱导人肾小管上皮细胞损伤中的作用

作者：刘丹骐; 雷俊; 黄凯; 尹光明^*

来源：中南大学学报(医学版), 2021, 46(03): 221-226.

• 肾小管
• 草酸
• 自噬
• 损伤
• 凋亡

目的:探讨细胞自噬在草酸诱导的人肾近曲小管上皮细胞HK-2损伤中的作用。方法:选择1 mmol/L的草酸干预HK-2细胞2 h建立细胞损伤模型,予以3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理抑制细胞自噬,应用光学显微镜观察细胞形态,通过蛋白质印迹法检测自噬标志蛋白质LC3II的表达,通过MTT法、流式细胞术分别检测细胞存活率和凋亡率。结果:经HE染色后在显微镜下观察,HK-2细胞在1和5 mmol/L 3-MA处理后无空泡化现象出现,而在1 mmol/L草酸处理后,细胞出现空泡化现象。与空白对照组比较,草酸显著上调HK-2细胞LC3II蛋白表达水平(0.62±0.03 vs0.35±0.02,P<0.05),1和5 mmol/L 3-MA均可抑制HK-2细胞基础自噬水平(分别0.17±0.03 vs 0.35±0.02,0.16±0.03 vs0.35±0.02,均P<0.05)。1 mmol/L 3-MA对草酸诱导HK-2细胞的LC3II蛋白表达无明显影响(0.61±0.04 vs 0.62±0.03,P>0.05),而5 mmol/L 3-MA明显下调草酸诱导HK-2细胞的LC3II蛋白表达(0.47±0.04 vs 0.62±0.03,P<0.05)。与空白对照组比较,草酸组HK-2细胞存活率下降[(77.32±2.69)%vs 100%,P<0.05],凋亡率上升[(8.32±1.05)%vs (2.36±0.29)%,P<0.05];而5 mmol/L 3-MA明显改善草酸组HK-2细胞存活率[(91.91±3.36)%vs (77.32±2.69)%,P<0.05],降低细胞凋亡率[(3.45±0.21)%vs (8.32±1.05)%,P<0.05],1 mmol/L 3-MA对细胞存活率[(80.48±3.41)%vs (77.32±2.69)%]、凋亡率[(7.81±0.47)%vs (8.32±1.05)%]无明显影响(P>0.05)。结论:草酸(1 mmol/L)可诱导HK-2细胞发生自噬,3-MA可通过抑制自噬减轻草酸对HK-2细胞的损伤,从而发挥保护作用。

• 单位
  中南大学湘雅三医院