不同剂量电离辐射对人γδT细胞体外增殖与细胞毒活性的影响

作者：王路路; 周忠海; 陈玲; 杨阳; 陈复兴; 孙蕾清; 吕小婷; 冯守信^*

来源：生物医学工程与临床, 2022, 26(06): 682-688.

DOI：10.13339/j.cnki.sglc.20221021.016

• 电离辐射
• 不同剂量
• γδT细胞
• 贴壁细胞
• 增殖活性
• 细胞毒活性

目的 探讨不同剂量电离辐射对人γδT细胞体外增殖与细胞毒活性的影响及其相关分子机制。方法 体外培养扩增人γδT细胞，第10天观察细胞形态特征，流式细胞术检测人γδT细胞百分含量。分别采用0.08、0.50、2.00、4.00、6.00 Gy X射线辐射人γδT细胞作为各辐照剂量组，以0.00 Gy组作为未辐射对照组。继续孵育24、48 h，收集细胞，在倒置相差显微镜下进行活细胞计数，乳酸脱氢酶释放法检测各组人γδT细胞对HepG2细胞的杀伤活性；流式细胞术检测各组穿孔素、颗粒酶B及CD107a的表达。结果 经10 d扩增后人γδT细胞百分含量为81.22%±3.51%，经磁珠阳性分选纯化后γδT细胞百分含量为96.76%±1.37%。0.08 Gy剂量组人γδT细胞增殖最为显著，24 h的扩增倍数为1.32±0.07(P <0.05),48 h的扩增倍数为2.22±0.11(P <0.01)；辐射后培养24 h的2.00 Gy剂量组、4.00 Gy剂量组人γδT细胞的杀伤活性分别为45.33%±3.22%、42.42%±3.54%，辐射后培养48 h的2.00 Gy剂量组、4.00 Gy剂量组人γδT细胞的杀伤活性分别为47.33%±3.81%、43.85%±3.39%，均显著高于未辐射对照组（分别P <0.01、P <0.05）。2.00 Gy剂量组或4.00 Gy剂量组人γδT细胞在辐照后培养48 h，细胞胞内抗原穿孔素分别为85.88%±3.37%、82.96%±3.55%，均显著高于未辐射对照组（P <0.01、P <0.05）；颗粒酶B表达分别为88.30%±4.26%、88.57%±3.92%，均显著高于未辐射对照组（P <0.01）;2.00 Gy剂量组人γδT细胞在辐照后培养48 h，细胞表面抗原CD107a表达为90.45%±2.56%，高于未辐射对照组（P <0.01）。结论 单次0.08 Gy电离辐射能够显著促进体外人γδT细胞增殖能力，单次2.00 Gy或4.00 Gy电离辐射可显著增强人γδT细胞对肝癌HepG2细胞的肿瘤杀伤活性；其机制可能与电离辐射促进人γδT细胞穿孔素、颗粒酶B及CD107a的表达相关。

• 单位
  徐州医科大学