水生栖热菌漆酶TaLac的性质分析及对孔雀石绿染料的脱除

作者：毛国涛; 王杰; 王凯; 王方园; 曹乐言; 张宏森; 宋安东^*

来源：生物技术通报, 2022, 38(04): 261-268.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2021-0852

• 漆酶
• DUF152家族
• 水生栖热菌
• 酶学性质
• 孔雀石绿的脱色及脱毒

为挖掘适用于脱除有毒染料孔雀石绿(malachite green，MG)的DUF152家族漆酶，利用生物信息学方法在嗜热菌水生栖热菌中筛选候选酶TaLac，构建重组表达载体pET28a-TaLac，在大肠杆菌中进行过量表达和纯化，测定TaLac的酶学性质，探究TaLac对MG的脱色和脱毒能力。结果表明，TaLac具有DUF152家族保守铜原子结合位点，利用Ni亲和层析纯化得到高纯度的TaLac具有氧化2，6-二甲基苯酚(2，6-dimethylphenol，DMP)等漆酶底物的催化活性。以DMP为底物，该酶的最适pH为5.0，最适温度为60℃，Km为0.74 mmol/L。此外，TaLac在50℃热处理4 h后，仍保留80%的原始活力；该酶可耐受高浓度的Mg2+、Ca2+、Mn2+、Zn2+和Ba2+等金属离子。TaLac可于3 h内使50 mg/L MG完全脱色，并彻底消除MG对玉米萌发的毒害作用。因此，TaLac是具有活性的DUF152家族漆酶，具有良好的热稳定性，可高效催化MG的脱色与脱毒。

• 单位
  河南农业大学; 生命科学学院