黄芩苷对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用及机制研究

作者：乐健伟; 樊恒; 孙敏; 朱建华^*

来源：中华危重病急救医学, 2021, 33(07).

• 黄芩苷
• 脓毒症
• 急性肾损伤
• 小鼠

目的探讨不同剂量黄芩苷(BAI)对脓毒症小鼠急性肾损伤(AKI)的保护作用及机制。方法按随机数字表法将100只实验小鼠分为假手术组(Sham组)、盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症模型组(CLP组)和BAI预处理组, 其中BAI预处理组根据BAI用量分为低、中、高剂量组(BAI-L+CLP、BAI-M+CLP、BAI-H+CLP组), 每组20只。通过CLP法制备小鼠脓毒症相关性急性肾损伤(SA-AKI)模型;Sham组仅开腹、关腹, 不予盲肠结扎、穿孔。BAI预处理组小鼠每日分别灌胃BAI 25、50、100 mg/kg, 持续3 d, 第3天灌胃结束后6 h行CLP制备脓毒症模型;Sham组及CLP组灌胃等量蒸馏水。各组分别于术后24 h随机处死10只小鼠取眼眶血, 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肾功能〔包括血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(pNGAL)及血肾损伤分子-1(pKIM-1)〕;取肾组织, 苏木素-伊红(HE)染色后, 光镜下观察肾组织损伤情况, 同时采用原位末端缺刻标记法(TUNEL)观察肾小管上皮细胞凋亡情况;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)测定肾组织细胞FLICE样抑制蛋白(c-FLIP)表达水平。各组其余10只小鼠用于统计术后7 d生存情况。结果 CLP组小鼠肾小管上皮细胞大量变性、坏死, 肾小管管腔明显扩张, 间质内可见炎性细胞广泛浸润, 肾功能急剧恶化。与CLP组比较, 给予低剂量BAI预处理后, 小鼠肾功能有所改善, 但各指标差异无统计学意义;给予中、高剂量BAI预处理后, 小鼠肾功能明显改善, SCr、BUN、pNGAL和pKIM-1均显著降低〔SCr(μmol/L):135.16±5.18、125.70±5.26比170.42±5.42, BUN(mmol/L):33.59±1.77、27.29±1.61比45.68±1.39, pNGAL(μg/L):91.29±4.68、73.40±3.77比131.50±6.55, pKIM-1(μg/L):6.34±0.30、5.51±0.35比8.03±0.29, 均P<0.01〕, 肾组织病理损伤显著减轻, 肾小管上皮细胞凋亡数量明显减少(个/HP:16.20±0.49、13.10±0.66比29.60±0.49, 均P<0.01), 肾组织c-FLIP蛋白表达水平显著升高〔c-FLIP蛋白(c-FLIP/GADPH):0.35±0.02、0.46±0.02比0.21±0.01, 均P<0.01〕。生存分析显示, Sham组小鼠7 d内均无死亡;与CLP组相比, BAI-L+CLP、BAI-M+CLP及BAI-H+CLP组小鼠7 d内平均生存时间明显延长, 并呈一定剂量依赖性(d:3.5±2.5、5.4±2.2、5.9±1.9比2.1±1.2;Log-Rank检验:χ2=73.410, P<0.001)。结论中、高剂量BAI预处理可显著改善SA-AKI小鼠肾功能、肾组织病理损伤和生存情况, 其机制可能与促进c-FLIP蛋白表达增高和抑制细胞凋亡相关。

• 单位
  宁波市第一医院