慢病毒介导的IGF-1R基因沉默对肝细胞癌的增殖和迁移的影响

作者：李晨阳; 张文彦; 张祎; 吴荣

来源：临床和实验医学杂志, 2017, 16(11): 1056-1060.

• 肝细胞癌
• RNA干扰
• 胰岛素样生长因子1受体
• PI3K/Akt
• Bax/Bcl-2

目的探讨慢病毒介导的胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)基因沉默对肝细胞癌的增殖和迁移的影响。方法设计并筛选高效特异性胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)基因的小干扰RNA,构建稳定遗传的慢病毒载体质粒,观察其转染沉默IGF-1R基因的肝癌细胞株Huh7细胞增殖、迁移以及侵袭能力,进一步观察其对PI3K/Akt及Bax/Bcl-2通路的影响。结果采用倒置相差荧光显微镜观察转染效果,镜下可见较多细胞特异性表达GFP绿色荧光,转染率超过80%。scrambled阴性对照组以及空白对照组IGF-1R mRNA及蛋白的相对表达量显著高于LV-IGF-1R-RNAi转染组(P<0.01)。成功转染后,培养细胞72 h、96 h,LV-IGF-1R-RNAi转染组增值率显著低于scrambled阴性对照组以及空白对照组(P<0.05或P<0.01)。侵袭实验和迁移实验均证实细胞明显受到抑制(P<0.01)。蛋白免疫印迹法显示,LV-IGF-1R-RNAi转染组p-PI3K、p-Akt及Bcl-2相对表达量显著低于scrambled阴性对照组以及空白对照组(P<0.05);而Bax显著高于scrambled阴性对照组以及空白对照组(P<0.05)。结论RNAi技术沉默IGF-1R基因表达能显著抑制肝癌细胞株Huh7细胞的增殖、侵袭作用,而这一作用可能与抑制PI3K/Akt通路蛋白磷酸化及调节Bax/Bcl-2通路蛋白表达有关。

• 单位
  中国医科大学附属盛京医院; 中国医科大学