流式细胞术在测定竹类植物基因组大小中的应用

作者：陈蓉芬; 黄坚钦; 陈荣; 徐川梅^*

来源：浙江农林大学学报, 2021, 38(01): 103-111.

• 分子生物学
• 竹类植物
• 基因组大小
• 流式细胞仪
• 荧光峰值

【目的】分析竹类植物不同组织部位及不同处理方法对其基因组大小的影响,可提高植物基因组大小测定精度。【方法】以竹类植物叶片和笋为材料,以水稻Oryza sativa为参照,设置细胞核染色时间为1、3、5、7、9、12、18、24和30 min共9个梯度,利用流式细胞仪对不同组织部位及处理的基因组大小进行分析。【结果】(1)对同一竹种而言,其叶片和笋流式峰形图相似,基因组大小仅存在微小差异,差值为0.04～0.20 pg。(2)不同竹种对染色时间要求不同,其中,唐竹Sinobambusa tootsik、花叶唐竹Sinobambusa tootisikf.albo-striata、平安竹Pseudosasa japonicavar.tsutsumiana、曙筋矢竹Pseudosasa japonica f. akebono、美丽箬竹Indocalamus decorus、花叶赤竹Sasaella glabra f. albo-striata及红秆寒竹Chimonobambusa mamorea f. variegata染色1 min即达到最大荧光峰值,孝顺竹Bambusa multiplex和黄皮绿筋竹Phyllostachys sulphurea染色3 min达到最大峰值,茶竿竹Pseudosasa amabilis var. amabilis和柳叶细竹Thyrsostachy ssiamensis染色5 min达到最大峰值,仅黄皮刚竹Phyllostachys sulphurea(叶片)7 min达到最大峰值。(3)12个竹种的荧光强度在1～30 min内存在较大变化,除茶竿竹、柳叶细竹、孝顺竹叶片及唐竹笋外,其他竹种的荧光强度变化值均在5%以上,特别是平安竹和花叶赤竹变化更大,分别为12.93%和12.88%。(4)热带木本竹种孝顺竹和柳叶细竹基因组大小为(1.64±0.54)～(2.69±1.01) pg,其他10个温带竹种基因组大小为(3.76±1.51)～(5.73±1.85) pg。10个温带竹种中,刚竹属Phyllostachys竹种基因组较小,大小为(3.76±1.51)～(3.91±0.95)pg,其他竹属的一些竹种基因组较大,大小为(4.82±0.54)～(5.73±1.85) pg。【结论】(1)竹类植物叶片和笋均可作为基因组大小分析材料,细胞核染色时间对基因组大小测定结果存在一定影响,染色时间以3～5 min最佳。(2)热带木本竹种基因组大小明显小于温带木本竹种,温带木本竹种中,刚竹属竹种的基因组大小明显小于其他竹种。图1表5参29

• 单位
  浙江农林大学