摘要
目的观察重组人白介素-10(IL-10)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激的血管外膜成纤维细胞(NIH/3T3细胞)增殖和syndecan-4蛋白表达的影响。方法采用体外培养的NIH/3T3细胞,分别应用终质量浓度为20 ng/mL TNF-α、100 ng/mL IL-10、200 ng/mL IL-10、100 ng/mL IL-10联用20 ng/mL TNF-α、200 ng/mL IL-10联用20 ng/mL TNF-α作用24 h,并设对照组进行比较,采用MTS/PMS法确定NIH/3T3细胞的增殖状态,利用Western blot蛋白免疫印迹法测定NIH/3T3细胞中syndecan-4蛋白的表达。结果(1)MTS/PMS法测定各组细胞增殖率统计分析显示:与对照组比较,TNF-α组能显著刺激NIH/3T3细胞的增殖(P<0.001),而IL-10不同剂量组单独应用对NIH/3T3细胞的增殖均无明显作用(P>0.05)。IL-10联合TNF-α共同作用组与TNF-α组比较,NIH/3T3细胞增殖均显著减少(P<0.01)。(2)Westernblot蛋白免疫印迹法测定显示:与对照组比较,TNF-α组能显著刺激NIH/3T3细胞中的syndecan-4蛋白表达(P<0.05),而IL-10不同剂量组单独应用对NIH/3T3细胞的syndecan-4蛋白表达均无明显影响(P>0.05)。IL-10联合TNF-α共同作用组与TNF-α组比较,NIH/3T3细胞的syndecan-4蛋白表达显著降低(P<0.001)。结论IL-10可明显抑制TNF-α诱导的NIH/3T3细胞增殖及细胞syndecan-4蛋白的表达。
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单位南方医科大学; 南方医院; 广东药学院