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摘要
目的建立miR-133b在人卵巢颗粒肿瘤细胞(COV434)中的过表达模型,探讨其对FOXL2基因表达的影响,及其对COV434细胞的迁移增殖的作用。方法以生物信息学方法分析miR-133b是否靶向作用于FOXL2基因的UTR区域,依据预测结果设计合成靶向FOXL2 3'UTR的miR-133b mimics,运用脂质体法将miR-133b mimics瞬时转染入COV434细胞中,观察荧光以确定转染时间; miR-133b mimics转染人卵巢颗粒肿瘤细胞后,使用qRT-PCR检测COV434细胞中FOXL2基因mRNA的表达水平,使用Western Blot法检测FOXL2蛋白表达水平,细胞划痕试验检测miR-133b转染后COV434细胞的迁移情况,MTT法检测miR-133b转染后COV434细胞的增殖情况。结果 miR-133b作用于FOXL2 mRNA的3'UTR区域,阴性对照组与空白对照组比较,COV434细胞FOXL2基因mRNA和蛋白的表达水平均无统计学差异(P>0.05),而miR-133b转染组与阴性对照组和空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),提示miR-133b能显著抑制FOXL2 mRNA和蛋白的表达。同时,miR-133b转染COV434细胞后亦能明显抑制COV434细胞的迁移与增殖。结论 miR-133b可抑制COV434细胞FOXL2 mRNA和蛋白的表达,进而抑制COV434细胞的迁移和增殖。
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单位上海交通大学医学院附属第九人民医院; 潍坊市人民医院
