弓形虫SAG1-MIC3融合基因真核表达载体的构建与鉴定

作者：田小东; 古钦民; 周怀瑜; 张加勤; 丛华; 赵群力; 李瑛

来源：中国病原生物学杂志, 2008, (03): 190-193+214.

DOI：10.13350/j.cjpb.2008.03.012

• 刚地弓形虫
• MIC3
• SAG1
• 疫苗
• 构建
• 表达 Toxoplasma gondii
• vaccine
• construction
• expression

目的构建编码弓形虫RH株膜表面蛋白1(SAG1)和微线体蛋白3(MIC3)的重组真核表达载体pcDNA3.1-SAG1-MIC3并鉴定,为弓形虫疫苗研制作准备。方法采用PCR技术从弓形虫基因组DNA中分别扩增SAG1和MIC3基因片段,分别克隆入pMD18-T载体,并对重组入外源基因的质粒通过PCR、酶切和测序鉴定;采用亚克隆技术将SAG1和MIC3基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),经含氨苄青霉素的LB平板筛选阳性重组质粒pcDNA3.1-SAG1-MIC3,PCR、酶切和测序鉴定;采用脂质体法将重组载体转染Hela细胞,经RT-PCR法检测转染细胞转录情况。结果MIC3和SAG1...

• 单位
  山东大学