miR-1236模拟物转染对前列腺癌细胞生长影响

作者：黄耿; 毛青; 桂定文; 姜卫东

来源：中华肿瘤防治杂志, 2017, 24(14): 966-970.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2017.14.004

• miR-1236
• 前列腺癌
• p21
• 增殖

目的 miR-1236为新发现的具有肿瘤抑制作用的RNA。本研究旨在探讨外源性miR-1236转染对前列腺癌细胞p21基因的激活作用及对其生长的影响。方法根据对前列腺癌细胞的不同处理分为阴性对照组(转染dsControl)和实验组(转染miR-1236)2组。qRT-PCR检测p21、细胞周期依赖性激酶CDK4和CDK6mRNA的表达变化。蛋白质印迹检测p21、CDK4和CDK6蛋白的表达变化。流式细胞术检测细胞周期分布。MTS法检测细胞活力,集落形成实验检测细胞增殖能力。结果与dsControl组相比,转染miR-1236后2种细胞中p21mRNA表达分别上调2.16(t=12.67,P<0.01)和2.26倍(t=10.93,P<0.01);CDK4mRNA的表达分别下调0.56(t=6.617,P<0.01)和0.43倍(t=5.698,P<0.01);CDK6mRNA的表达分别下调0.78(t=3.101,P<0.05)和0.71倍(t=3.841,P<0.01)。蛋白质印迹检测结果与qRT-PCR结果相符。流式细胞术结果显示,转染miR-1236后,位于S期和G2/M期的细胞比例明显下降,位于G0/G1期的细胞比例明显增大。MTS法显示,与dsControl组相比,转染miR-1236 2种细胞活力明显下降。dsControl组DU145和PC-3细胞形成的集落数分别为241±37.64和254.33±38.18;miR-1236组DU145和PC-3细胞形成的集落数明显减少,分别为99.67±34.2(t=3.939,P<0.05)和81±35.55(t=4.354,P<0.05),提示细胞增殖能力降低。结论外源性miR-1236能通过激活前列腺癌细胞中p21蛋白的表达并显著抑制其生长,可能成为前列腺癌基因靶向治疗的新靶点。

• 单位
  湖北理工学院; 黄石市中心医院