大鼠胰岛的分离和纯化

作者：侯凌; 尹注增; 向莹; 李俊华; 陈实; 陈刚; 罗小平

来源：华中科技大学学报(医学版), 2009, 38(03): 413-416.

DOI：10.3870/j.issn.1672-0741.2009.03.035

• 大鼠胰岛
• 分离
• 纯化

目的探讨获得足够数量和较高纯度大鼠胰岛的分离和纯化方法。方法采用Ⅴ型胶原酶灌注消化法分离成年大鼠胰岛,Ficoll400非连续密度梯度法纯化胰岛。双硫腙(DTZ)染色鉴定培养的胰岛细胞,锥虫蓝染色检测细胞活性。葡萄糖刺激胰岛素释放试验评价胰岛细胞的功能。结果分离纯化后大鼠胰岛平均收获量为(480±30)IEQ,纯度大于90%,活性大于90%。在低糖和高糖刺激下,胰岛素分泌量分别为(12.28±0.89)mIU/L、(19.01±1.49)mIU/L,二者相比较,差异有统计学意义(P<0.05),刺激指数为(1.55±0.01)。结论胶原酶Ⅴ逆行灌注消化胰腺和Ficoll400非连续密度梯度纯化法,可获得高纯度高活率的大鼠胰岛。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院