肝活素转录激活肝源性细胞FOXA2抑制内质网应激

作者：王效芳; 韩子轩; 杨洋; 张梦洁; 吴勤录; 向慎思; 万悦; 董典典; 陈慧^*; 于淼^*

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2023, 39(12): 1753-1764.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2023.11.1194

• 肝活素
• 叉头框蛋白A2
• 肝细胞核因子6
• 表达调控

肝活素(hepassocin, HPS)是一种由肝合成和分泌的活性因子，参与肝再生与物质代谢，重组肝活素可以救治小鼠化学性肝损伤和非酒精性脂肪性肝炎，但其具体的分子机制仍需深入研究。前期采用RNA测序技术(RNA-seq)分析发现，HPS敲除小鼠肝中叉头框蛋白A2(forkhead box A2,FOXA2)的表达显著降低。FOXA2是肝内富集表达的重要转录因子，我们推测FOXA2可能是HPS调节肝多种生物学功能的关键靶点。本研究首先通过Western印迹和Real-time PCR证明FOXA2在HPS敲除小鼠肝组织中的表达显著降低(P<0.01),随后在细胞水平证明，重组HPS能显著增加FOXA2的表达(P<0.01)。通过克隆侧翼序列构建FOXA2启动子报告基因，在此基础上通过大片段截断、精细缺失发现FOXA2响应HPS信号的顺式作用元件位于转录起始位点上游-814～-797 bp,为肝细胞核因子6(hepatocyte nuclear factor 6, HNF6)的结合序列。通过凝胶迁移实验(electrophoretic mobility shift assay, EMSA)的结果证明，HPS可以促进HNF6与该序列的结合，并具有剂量依赖效应。通过慢病毒感染证明，在HPS敲除小鼠原代肝实质细胞中回补FOXA2会减轻内质网应激(P<0.01)。本研究为探索HPS调节肝功能稳态的分子机制提供了新的线索。

• 单位
  河北大学; 中国人民解放军军事科学院; 基础医学院; 安徽医科大学; 生命科学学院