1b型HCV-NS3真核表达载体的构建及对HepG2细胞凋亡的影响

作者：张海栋; 张锦前; 王琦; 刘顺爱; 成军; 赵龙凤; 贾因棠

来源：中国医药指南, 2012, (21): 84-86.

DOI：10.15912/j.cnki.gocm.2012.21.476

• 丙型肝炎病毒
• NS3
• 凋亡

目的构建1b型HCV-NS3基因真核表达载体,转染HepG2细胞并做表达谱基因芯片,筛选其影响肝癌细胞凋亡的差异表达基因,为进一步研究HCVNS3致病的分子生物学机制准备了条件。方法采集1b型HCV感染患者血清,提取HCV RNA,PCR获得HCV-NS3编码片段,经T-A克隆,构建pcDNA3.1-myc-His(-)-NS3,用pcDNA3.1(-)及上述重组载体的转染级质粒瞬时转染HepG2细胞,用蛋白免疫印迹检测,同时提取细胞总RNA,进行人类全基因组表达谱测定。结果从1b型HCV感染患者血清RNA中扩增出的1893bp片段大小正确,双酶切凝胶电泳结果证明已将此片段克隆到pcDNA3....

• 单位
  山西医科大学第一医院; 首都医科大学附属北京地坛医院