摘要
目的观察镰形棘豆总黄酮(FOF)对胃癌细胞凋亡及Toll样受体4(TLR4)/MyD88/NF-κB通路的影响。方法 MTT法检测不同浓度FOF作用下胃癌细胞株SGC7901、MKN-49P、AGS、MKN45、KATOⅢ的增殖情况,确定以IC50最小的SGC7901细胞作为受试细胞,FOF作用浓度为10~40μg/m L、作用时间为48 h。将对数生长期的SGC7901细胞分为6组,脂多糖(LPS)组加入2μg/m L的TLR4激活剂LPS,ER+LPS组先加入100 nmol/L TLR4抑制剂Eritoran处理2 h后再加入2μg/m L LPS,LFOF、MFOF、HFOF+LPS组先分别加入10、20、40μg/m L FOF处理2 h后再加入2μg/m L LPS,空白组加入等量溶媒。处理48 h后,用流式细胞仪测算细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞中的细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Survivin)、TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白(TLR4、p-TLR4、MyD88、p-MyD88、p65、p-p65),细胞免疫荧光法观察细胞p65蛋白进核情况。结果与空白组比较,LPS组SGC7901细胞凋亡率下降,Bax蛋白表达降低,Bcl-2、Survivin、p-TLR4、p-MyD88及p-p65蛋白表达上升,p65进核量增加(P均<0. 05);与LPS组比较,ER+LPS组、LFOF+LPS组、MFOF+LPS组和HFOF+LPS组SGC7901细胞凋亡率上升,Bax蛋白表达升高,Bcl-2、Survivin、p-TLR4、p-MyD88及p-p65蛋白表达降低,p65进核量减少(P均<0. 05)。结论 FOF可诱导胃癌SGC7901细胞凋亡,该作用与其抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路活性有关。
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