胶质瘤中脑肿瘤干细胞的分离、培养和鉴定

作者：王存祖; 赵鹏; 尤永平; 陆小明; 陈云祥; 傅震; 鲁艾林; 刘宁

来源：江苏医药, 2009, 35(01): 8-11+131.

DOI：10.19460/j.cnki.0253-3685.2009.01.003

• 胶质瘤
• 脑肿瘤干细胞
• CD133

目的分离、培养和鉴定胶质瘤中脑肿瘤干细胞(BTSC),探讨CD133作为BTSC特异性标记,用于BTSC分离的可行性。方法9例胶质瘤临床标本,胶质瘤C6和U87细胞系,用直接培养和磁珠选择CD133+细胞二种方法分离BTSC。参照NSC培养条件,进行体外培养。观察细胞生长情况,利用免疫荧光染色检测细胞标记,包括Nestin,神经元特异性烯醇化酶(NSE),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)等;诱导细胞分化,验证该种细胞是否具有干细胞特性。结果9例临床标本中,有2例儿童恶性胶质瘤在培养过程中出现神经球,在成人胶质瘤中均未出现。C6和U87细胞中,均出现比较典型的神经球,二种分离方法结果相同。神经球细胞具有增殖能力,体外培养可以不断增大。标记检测显示这种细胞Nestin阳性,而NSE和GFAP阴性。经诱导后,可以分化为形态与来源细胞相似的细胞,能够表达NSE和GFAP等多种表型细胞标记。结论在胶质瘤中,存在具有NSC特性的干细胞,即BTSC。CD133是BTSC重要的表面标记,可以用于BTSC的分离。在胶质瘤细胞系中CD133+细胞是BTSC。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院