禽传染性支气管炎病毒S1蛋白单克隆抗体制备及其中和抗原表位的鉴定

作者：彭莉; 张焕东; 李忠斐; 肖鹏; 颜焰; 董伟仁; 周继勇; 廖敏^*

来源：中国兽医学报, 2023, 43(12): 2425-2432.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2023.12.04

• 禽传染性支气管炎病毒
• S1蛋白
• 单克隆抗体
• 中和抗原表位

为鉴定禽传染性支气管炎病毒(IBV)刺突(S1)蛋白的中和抗原表位，本研究通过IBV全病毒免疫BALB/c小鼠，经融合、亚克隆筛选获得了4株稳定分泌抗IBV S1蛋白抗体的杂交瘤细胞株4A11、1B11、5E5和7C9。经鉴定制备的单克隆抗体腹水抗体ELISA效价为106以上，Western blot和间接免疫荧光试验分析显示该单克隆抗体反应性和特异性良好。随后用8种基于S1分型的IBV毒株为试验毒株，同实验室已有的8株IBV S1单抗(1E9、1H1、1E4、3C6、3C7、2F3、2E5、4F9)共12株单抗进行气管环中和活性检测，发现S1蛋白单抗与8种S1亚型的毒株均有不同程度的中和作用。随后，在抗原表位和Western blot分析的基础上，鉴定出单克隆抗体识别的抗原表位区域，获得了6个中和抗原表位，其中除416IQTRTEP422表位，其他5个表位仍未有相关报道。本研究成功制备出4株特异性识别S1蛋白且具有中和活性的单克隆抗体，不仅丰富了IBV的单克隆抗体库，为今后研究IBV S1蛋白分子结构提供了关键生物材料；获得的6个S1蛋白中和抗原表位也为后续建立IBV疫苗免疫效果评价方法和亚单位疫苗开发提供了工具。

• 单位
  动物科学学院; 浙江大学