沉默AGER基因表达抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

作者：李春双^*; 王颖; 张钊; 王建委; 白洁

来源：肿瘤, 2020, 40(12): 821-833.

• 癌,非小细胞肺
• 高级糖化终产物受体
• 细胞增殖
• 细胞运动
• 预后

目的:研究晚期糖基化终产物特异性受体(advanced glycosylation end-product specific receptor,AGER)对人肺腺癌细胞增殖、迁移及侵袭等肿瘤生物学行为的影响,并初步探讨可能的机制,以及AGER表达与肺腺癌患者预后的相关性。方法:采用脂质体转染法将特异性针对AGER基因的siRNA(siRNA-AGER)转入肺腺癌A549、H1299和H1975细胞,并通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法鉴定沉默效率。通过CCK-8法检测沉默AGER基因表达对人肺腺癌细胞增殖能力的影响,分别通过划痕实验和Transwell小室实验检测沉默AGER基因表达对人肺腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响,并进一步采用蛋白质印迹法检测沉默AGER基因表达对A549细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、波形蛋白(Vemintin)、Snail、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平的影响。通过免疫荧光法和蛋白质印迹法检测沉默AGER基因表达对A549细胞中β-catenin蛋白核定位的影响。通过Survexpress数据库探究AGER在肺腺癌患者中的表达差异及其表达水平与预后之间的相关性。结果:沉默AGER基因表达后,A549、H1299和H1975细胞的增殖能力均明显受到抑制(P值均<0.001);划痕实验和Transwell小室实验提示,A549、H1299和H1975细胞的迁移及侵袭能力下降(P值均<0.000 1);蛋白质印迹法检测结果提示,A549细胞中PCNA、Vemintin、Snail、MMP-2和MMP-9蛋白的表达量明显下调(P值均<0.001)。免疫荧光实验和蛋白质印迹法检测结果均提示,沉默AGER基因表达后细胞核内β-catenin蛋白的表达水平明显减少。Kaplan-Meier法分析结果提示,AGER表达水平越高,患者总体生存率越低(P=0.046 3)。结论:沉默AGER基因表达可以显著抑制人肺腺癌细胞系的增殖、侵袭及迁移能力,并下调细胞核内β-catenin蛋白的水平;提示AGER可能通过激活Wnt/β-catenin通路起到促癌作用,并且与临床预后紧密相关。

• 单位
  唐山市工人医院