微小RNA-335-5p调控BMP-2对人BMSCs成骨分化的影响

作者:黄振明; 蔡卓; 钱静; 汪建雄; 胡宁*
来源:中国修复重建外科杂志, 2020, 34(06): 781-786.
DOI:10.7507/1002-1892.201910097

摘要

目的探讨微小RNA(micro RNA,miR)-335-5p调控BMP-2对人BMSCs(human BMSCs,hBMSCs)成骨分化的影响。方法体外培养hBMSCs,随机分为对照组(A组)、miR-335-5p mimics(模拟物)组(B组)、miR-335-5p mimics阴性对照组(C组)、miR-335-5p inhibitor(抑制剂)组(D组)、miR-335-5p inhibitor阴性对照组(E组),分组处理后并诱导其成骨分化,行ALP及茜素红染色检测各组细胞成骨分化情况;采用实时荧光定量PCR检测各组细胞miR-335-5p、BMP-2及成骨相关基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA的表达;采用Western blot检测各组细胞Runx2、OPN、OCN、BMP-2蛋白表达情况。结果与A组比较,B组ALP阳性细胞相对比例,矿化结节相对比例,BMP-2、miR-335-5p、OCN、OPN、Runx2 mRNA相对表达量,Runx2、OPN、OCN、BMP-2蛋白相对表达量均明显升高,D组各指标均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);C、E组各指标与A组比较无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-335-5p可上调BMP-2表达,进而促进hBMSCs成骨分化。

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