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摘要
目的 利用RNAi技术沉默LNCAP细胞中前列腺特异性膜抗原（PSMA）表达并检测表达情况，检测沉默PSMA后LNCAP细胞迁移及侵袭等生物学行为的变化情况，以及LNCAP细胞中上皮-间质转化标志蛋白的变化情况。方法 培养LNCAP细胞，分为si-PSMA组，阴性对照（negative control siRNA）组，抑制剂LY294002组和LY294002+si-PSMA组，采用qRT-PCR和Western blot技术检测沉默PSMA后LNCAP细胞中PSMA的mRNA和蛋白表达情况，通过Transwell小室穿透实验检测LNCAP细胞迁移及侵袭能力改变，通过Western blot蛋白印迹法检测E-cadherin、β-cadherin、vimentin,snail等细胞上皮-间质转化标志蛋白的表达情况以及p-Akt(ser473)蛋白表达情况。结果 与阴性对照组相比，si-PSMA组PSMA的mRNA和蛋白表达水平都明显降低（P<0.05）,Transwell结果显示迁移及侵袭细胞增多（P<0.01）,LY294002组细胞迁移及侵袭下调（P<0.05），而LY294002+si-RNA组则可逆转下降趋势（P<0.05）,Western blot结果显示E-cadherin与β-cadherin的表达减弱，而vimentin、snail和p-Akt(ser473)的表达增强。结论 沉默PSMA可能通过激活上皮间质化通路促进前列腺癌细胞迁移及侵袭能力。
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