大鼠Cx43基因慢病毒表达载体的构建及转染骨髓间充质干细胞表达的观察

作者：李松南; 毛晓波; 冯义柏; 王祥; 曾秋棠; 毛奕; 吉庆伟; 彭昱东; 郭敏; 梁志山

来源：临床心血管病杂志, 2010, (11): 854-858.

• 骨髓间充质干细胞
• 缝隙连接蛋白43
• 慢病毒 connexin 43
• bone marrow mesenchymal stem cell
• lentiviral virus

目的:构建大鼠缝隙连接蛋白43(Cx43)基因的重组慢病毒表达载体,并转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC),观察Cx43的表达。方法:采用RT-PCR技术获得大鼠Cx43基因,并将其连接到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒表达载体pGC-FU中,重组获得慢病毒质粒pGC-FU-Cx43,将其与辅助包装质粒(pHelper1.0、pHelper2.0)一起共转染293T细胞,包装生产病毒并测定滴度。所获慢病毒感染大鼠BMSC后,采用荧光显微镜和Western blot方法检测Cx43的表达。结果:酶切证实Cx43基因已定向连入目的载体,测序结果显示,所构建的pGC-FU-Cx43重组...

• 单位
  首都医科大学附属北京安贞医院; 华中科技大学同济医学院; 华中科技大学