组蛋白乙酰转移酶GCN5对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的作用

作者：何宝明; 高洁^*

来源：解放军医学杂志, 2023, 48(06): 686-693.

• H3乙酰化
• GCN5
• 脂多糖
• 肺泡上皮细胞
• 急性肺损伤

目的 探讨组蛋白乙酰转移酶GCN5介导的组蛋白H3乙酰化对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞(A549细胞)增殖、凋亡及炎性因子表达的作用。方法 将A549细胞随机分为6组：对照组、LPS组、NC+LPS组、GCN5+LPS组、MB-3(GCN5抑制剂)+LPS组和GCN5+MB-3+LPS组。分别比较对照组、LPS组和GCN5+LPS组，以及LPS组、MB-3+LPS组和GCN5+MB-3+LPS组的组蛋白H3乙酰化水平、GCN5表达水平、细胞活性与增殖情况、细胞凋亡情况、炎性因子水平的差异。采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测GCN5 mRNA表达水平；CCK-8试剂盒检测细胞活性；EdU实验检测细胞增殖情况；流式细胞术检测细胞凋亡情况；Western blotting检测GCN5、H3K9ac、H3K14ac、H3K23ac、Caspase-3和Bcl-2蛋白表达水平；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果 与对照组A549细胞比较，LPS组的H3K9ac、H3K14ac、H3K23ac、Bcl-2蛋白及GCN5mRNA与蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)，细胞活性和增殖能力下降(P<0.05)，细胞凋亡、Caspase-3蛋白和炎性因子水平增高(P<0.05)。与LPS组比较，NC+LPS组GCN5 mRNA与蛋白表达水平差异不明显(P>0.05);GCN5+LPS组H3K9ac、H3K14ac、H3K23ac蛋白及GCN5 mRNA与蛋白表达水平均明显增高(P<0.05)，细胞活性和增殖能力增高(P<0.05)，细胞凋亡和炎性因子水平降低(P<0.05)。与GCN5+LPS组比较，GCN5+MB-3+LPS组的H3K9ac、H3K14ac、H3K23ac蛋白表达水平及细胞活性与增殖能力均降低(P<0.05)，细胞凋亡和炎性因子水平增高(P<0.05)。结论 GCN5过表达可抵抗LPS诱导的肺泡上皮细胞增殖与凋亡异常及炎性因子分泌，这可能与其提高组蛋白H3乙酰化水平有关。

• 单位
  汉中市疾病预防控制中心; 汉中市中心医院