CFSE标记神经祖细胞方法的建立与验证

作者：周佳锋; 马孟杰; 彭小忠^*; 舒鹏程^*

来源：基础医学与临床, 2021, 41(05): 648-652.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2021.05.005

• 羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)
• 神经祖细胞
• 流式细胞荧光分选术(FACS)

目的建立并验证羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)荧光探针标记神经祖细胞(NPCs)的方法。方法在胚胎期小鼠侧脑室注射CFSE以标记室周区(VZ)细胞,在注射后的1 h和3 h分别收集组织,通过免疫荧光方法检测其特异性。在注射后的1 h分离出背侧新皮质,通过流式细胞荧光分选术(FACS)分选强阳性细胞,并通过干细胞标志物、神经元标志物等验证。结果 CFSE能够瞬时标记VZ区细胞,标记窗在3～6 h。CFSE进行长时程标记会出现衰减。利用CFSE分选所得细胞70%为神经祖细胞,少量为神经元等。结论 CFSE能够用于瞬时及长时程在体标记。CFSE还可用于分选神经祖细胞,但尚需调整分选策略以提高特异性(FACS)。

• 单位
  中国医学科学院医学生物学研究所; 医学分子生物学国家重点实验室; 中国医学科学院基础医学研究所; 北京协和医学院