组蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用检测

作者：李玮妮; 李法曾; 张浩; 陈立涵; 程龙; 徐小洁; 刘婕; 叶棋浓

来源：生物技术通讯, 2013, (02): 165-168.

• 组蛋白
• 酵母双杂交
• 表观遗传 histone
• yeast two-hybrid system
• epigenetics

目的:构建组蛋白H2A、H2B、H3、H4的酵母双杂交诱饵载体,检测其在酵母细胞中的表达和自激活活性,为应用酵母双杂交系统筛选与组蛋白相互作用的蛋白奠定基础。方法:扩增H2A、H2B、H3、H4蛋白基因编码区cDNA序列,克隆至酵母表达载体pGBK-T7中,再将其转化至酵母细胞AH109中,提取酵母总蛋白,检测各种组蛋白的表达,并检测表达的组蛋白在酵母细胞中对报告基因有无自激活作用。结果:将H2A、H2B、H3、H4基因的cDNA克隆至酵母表达载体pGBK-T7中,其中组蛋白H4得到正确表达,且对报告基因LacZ、HIS3、Ade无激活作用。结论:可以利用酵母双杂交系统筛选与H4相互作用的蛋白...

• 单位
  中国人民解放军军事医学科学院