Wnt/β-catenin信号通路在Sfrp1抑制乳鼠心肌纤维化中的作用及机制

作者：陶静; 魏娴; 马依彤^*

来源：山东医药, 2019, 59(23): 10-13.

• Wnt/β-catenin信号通路
• 可溶性卷曲相关蛋白1
• 心肌纤维化
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的探讨Wnt/β-catenin信号通路在可溶性卷曲相关蛋白1(Sfrp1)抑制乳鼠心肌纤维化中的作用及机制。方法选择日龄1～3 d的SD新生乳鼠8只,分离培养乳鼠心肌成纤维细胞,分为对照组、增殖模型组(TGF-β1组)、Sfrp1预处理组(TGF-β1+Sfrp1组)、激活剂实验组(TGF-β1+Sfrp1+Licl组)。对照组不加任何处理。TGF-β1组加入TGF-β1 10 ng/mL刺激12 h,建立增殖模型。TGF-β1+Sfrp1组先转染dsAAV9-Sfrp1病毒,第5天时加入TGF-β1 10 ng/mL刺激12 h。TGF-β1+Sfrp1+Licl组先转染dsAAV9-Sfrp1病毒,待孵育第4天时,将Wnt/β-catenin信号通路特异性激活剂Licl加入培养基,终浓度为20 mmol/L,然后加入TGF-β1 10 ng/mL。采用Western blotting法检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin、Dvl-1及肌成纤维细胞分化的标志蛋白α-SMA表达。采用MTT法检测细胞增殖。采用流式细胞术检测细胞周期。采用ELISA法检测细胞上清液Ⅰ型、Ⅲ型胶原含量。结果与对照组相比,TGF-β1组β-catenin、Dvl-1、α-SMA蛋白表达均上调,OD值及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量均升高(P均<0.05);与TGF-β1组相比,TGF-β1+Sfrp1组β-catenin、Dvl-1、α-SMA蛋白表达均下调,OD值及Ⅰ、Ⅲ型胶原均降低(P均<0.05);与TGF-β1+Sfrp1组相比,TGF-β1+Sfrp1+Licl组β-catenin、Dvl-1、α-SMA蛋白表达均上调,OD值及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量均升高,G0/G1期、G2/M期细胞百分比均降低,S期细胞百分比均升高(P均<0.05)。结论 Sfrp1可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,有效抑制心肌成纤维细胞增殖、胶原合成,促进肌成纤维细胞表型转化,从而缓解心肌纤维化的进展。

• 单位
  新疆医科大学第一附属医院; 新疆维吾尔自治区人民医院