自噬在缺氧条件下视网膜色素上皮细胞表达趋化因子IL-8、MCP-1中的作用

作者：李蓉; 姚国敏^*; 姚杨

来源：中国中医眼科杂志, 2020, 30(05): 313-323.

DOI：10.13444/j.cnki.zgzyykzz.2020.05.003

• 自噬
• 视网膜色素上皮
• 炎症
• 白细胞介素8
• 单核细胞趋化蛋白-1
• 缺氧

目的研究自噬在缺氧条件下视网膜色素上皮(RPE)细胞表达趋化因子白细胞介素8(IL-8)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)中发挥的作用。方法将培养良好的ARPE-19细胞分为对照组、缺氧组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)+缺氧组和氯喹(CQ)+缺氧组。对照组细胞在常氧条件下培养;缺氧组细胞在缺氧箱中培养;3-MA+缺氧组和CQ+缺氧组分别先用10 mM 3-MA或50μM CQ预处理细胞2 h,然后置于缺氧箱中继续培养。24 h后采用ELISA法检测细胞上清液中趋化因子IL-8、MCP-1的浓度;采用Western blot法检测细胞的自噬关键蛋白微管相关蛋白1轻链3 B (LC3B)、Beclin-1及p62的相对表达水平。对4组细胞表达的IL-8、MCP-1浓度和LC3B-II/I、Beclin-1及p62水平进行统计分析。结果 4组中IL-8、MCP-1浓度组间比较,差异均有统计学意义(IL-8:F=539.27,P=0.000;MCP-1:F=56.16,P=0.000);两两比较发现,缺氧组的IL-8、MCP-1浓度明显高于其它3组,差异均有统计学意义(IL-8:均P=0.000;MCP-1:缺氧组vs.对照组P=0.000;缺氧组vs. 3-MA组P=0.001;缺氧组vs. CQ组P=0.000)。4组细胞中的LC3B-II/I、Beclin-1及p62的相对蛋白表达量组间比较,差异均有统计学意义(LC3B-II/I:F=80.65,P=0.000;Beclin-1:F=139.29,P=0.000;p62:F=70.64,P=0.000)。两两比较发现,缺氧组细胞中LC3B-II/I的相对蛋白表达量明显高于对照组和3-MA组(缺氧组vs.对照组P=0.000;缺氧组vs. 3-MA组P=0.001);缺氧组中LC3B-II/I的相对蛋白表达量低于CQ组,差异有统计学意义(P=0.000);缺氧组细胞中Beclin-1的相对蛋白表达量均明显高于其它3组(缺氧组vs.对照组P=0.000;缺氧组vs. 3-MA组P=0.001;缺氧组vs. CQ组P=0.000);缺氧组细胞中p62相对蛋白表达量明显低于其它3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在缺氧条件下,自噬水平升高可促进RPE细胞趋化因子IL-8和MCP-1的表达。

• 单位
  西安医学院第一附属医院