环状RNA0026344靶向miR-21对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制

作者：尹航; 齐小峰; 黄欣; 苏群; 马涛

来源：山东医药, 2021, 61(19): 39-43.

• 肝癌
• 环状RNA0026344
• 微小RNA-21
• 细胞增殖
• 细胞迁移
• 细胞侵袭

目的探讨环状RNA0026344(circ0026344)靶向微小RNA-21(miR-21)对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制。方法收集25例肝癌患者术中切除的肝癌组织及其癌旁组织(距离肿瘤边缘>3 cm),用qRT-PCR检测组织中circ0026344、miR-21表达。常规培养HCC9204细胞,将细胞随机分组并转染,分为pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-circ0026344组(转染pcDNA-circ0026344)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-21组(转染anti-miR-21)、pcDNA-circ0026344+miR-NC组(转染pcDNA-circ0026344+miR-NC)、pcDNA-circ0026344+miR-21组(转染pcDNA-circ0026344+miR-21 mimics)。转染48 h后用RT-qPCR检测各组circ0026344、miR-21表达,确认转染效率。用MTT法检测细胞增殖能力,用平板克隆实验检测细胞克隆形成数,用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告实验验证circ0026344与miR-21的靶向关系,Western blotting法检测细胞内上皮间充质转化(EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin)表达。结果与癌旁组织比较,肝癌组织中circ0026344相对表达量低,而miR-21相对表达量高(P均<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-circ0026344组HCC9204细胞增殖能力、克隆形成数、迁移及侵袭细胞数、N-cadherin蛋白相对表达量低(P均<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量高(P<0.05)。Circular RNA Interactome数据库在线分析显示,miR-21与circ0026344存在特异性结合位点。与miR-NC+wt-circ0026344共转染比较,miR-21 mimics+wt-circ0026344共转染后细胞相对荧光素酶活性低(P<0.05);而与miRNC+mut-circ0026344共转染比较,miR-21 mimics+mut-circ0026344共转染后细胞相对荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05)。与anti-miR-NC组比较,anti-miR-21组HCC9204增殖能力、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、N-cadherin蛋白相对表达量低(P均<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量高(P<0.05)。与pcDNA-circ0026344+miR-NC组比较,pcDNA-circ0026344+miR-21组增殖能力、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、N-cadherin蛋白相对表达量高(P均<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量低(P<0.05)。结论 circ0026344可靶向miR-21抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭,其作用机制可能与调控EMT有关。

• 单位
  解放军总医院