摘要

为促进茶籽资源的深度开发利用,采用不同截留分子量的超滤膜对混菌发酵茶籽多肽产物进行分级分离,比较不同分子量段茶籽多肽的抗氧化活性与其分子量对应关系;利用色谱技术对茶籽多肽逐级纯化,获得特征性茶籽抗氧化肽;以H2O2诱导小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)建立氧化损伤模型,评价茶籽抗氧化肽的细胞氧化损伤保护功能。结果表明:经超滤分级后,茶籽多肽的抗氧化性能与其分子量大小呈负相关,以分子量小于1 kDa的TSP4组分具有最高的自由基清除能力;TSP4肽段分子量分布范围在273~848 Da之间,色谱纯化出的TSP4-b亚组分相对分子量445 Da左右,其二级结构中的β-折叠从16.59%上升至44.43%,α-螺旋则由37.61%降至17.57%;TSP4-b在20~60 ℃范围内,以及经模拟胃肠消化后,自由基相对清除率仍可分别保持在90%及80%以上,具备良好的热稳定性及抗消化能力;添加中、高剂量的TSP4-b后,MEF细胞存活率分别达到73.8%、82.4%,显示其对H2O2诱导的细胞损伤具有保护作用。

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