一种塞内卡病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者:王秀明; 陈君彦; 魏学峰; 刘国英; 关平原; 范秀丽; 张贵刚; 武瑾贤; 王艳杰; 刘建奇
来源:畜牧兽医科学(电子版), 2019, (04): 1-5.

摘要

为建立一种塞内卡病毒实时荧光定量PCR方法,研究针对塞内卡病毒3C基因保守区域设计了一对引物和探针,将3C基因克隆到pCR-4 TOPO载体中,以重组质粒为标准品,通过优化PCR反应条件,建立了一种检测SVA的实时荧光定量PCR方法。结果表明,该检测方法的敏感性达到2.5×10 copies/μL,灵敏度高于普通PCR;与其他相关病毒及细菌均不发生交叉反应,批内和批间试验重复性的变异系数(CV)均小于4%,具有良好的稳定性。研究建立的一种塞内卡病毒实时荧光定量PCR方法可以检测SVA的定性和定量,对SVA快速诊断检测具有重要意义。

  • 单位
    金宇保灵生物药品有限公司