兔抗猪CD163蛋白多克隆抗体制备及鉴定

作者：郭娟娟; 彭金美; 安同庆; 冷超良; 吴江; 宫大庆; 陈家锃; 杨永倩; 田志军; 张德礼

来源：中国兽医学报, 2012, (11): 1624-1628.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2012.11.003

• CD163
• 抗体
• 鉴定 CD163
• antibody
• identification

为制备兔抗猪CD163多克隆抗体,采用RT-PCR方法从猪PAM RNA中扩增CD163胞质外区部分基因SRCR4-5,克隆至pGEX-6p-1原核表达载体,在IPTG诱导下获得约50 000以包涵体形式表达的重组蛋白。WesternBlotting分析表明,表达产物能够被GST单抗所识别。用该重组蛋白免疫兔制备多抗血清,经间接ELISA检测,多抗血清效价可达105,流式检测发现可与Marc-145和PAM上的天然CD163分子相互作用。抗体阻断试验证明制备的多抗血清可以部分阻断PRRSV感染。本试验为进一步研究PRRSV与受体-CD163相互作用机制打下了基础。

• 单位
  西北农林科技大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院