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摘要
根据已发表的山羊痘福州株全基因组,以其H7R基因进行引物设计,从古浪株中提取绵羊痘全基因组首次克隆H7R基因。将目的片段插入p MD19-simple载体后使用Bam HI+Not I双酶切构建p ET-28a-H7R原核表达载体,经测序验证构建载体正确。将重组质粒转化到Rosetta感受态通过IPTG诱导,SDS-PAGE检测,结果表明:在17 ku处出现明显条带,经过几次条件优化,H7R在大肠杆菌中主要以包涵体的形式表达。这为后续研究羊痘病毒的入侵及新型疫苗的研究奠定了基础。
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根据已发表的山羊痘福州株全基因组,以其H7R基因进行引物设计,从古浪株中提取绵羊痘全基因组首次克隆H7R基因。将目的片段插入p MD19-simple载体后使用Bam HI+Not I双酶切构建p ET-28a-H7R原核表达载体,经测序验证构建载体正确。将重组质粒转化到Rosetta感受态通过IPTG诱导,SDS-PAGE检测,结果表明:在17 ku处出现明显条带,经过几次条件优化,H7R在大肠杆菌中主要以包涵体的形式表达。这为后续研究羊痘病毒的入侵及新型疫苗的研究奠定了基础。
