大黄酚调控AMPK/mTOR自噬信号通路改善Wilson病铜负荷大鼠认知功能

作者：张笑颜; 王谢; 王杰; 蔡标; 谢道俊^*

来源：中国中西医结合杂志, 2023, 43(05): 578-584.

• Wilson病
• 大黄酚
• 认知损害
• 自噬
• AMPK/mTOR信号通路
• 中药

目的 研究大黄酚（chrysophanol,CHR）对Wilson病（WD）铜负荷大鼠模型的神经保护作用，并探讨其作用机制。方法 SD大鼠随机分为4组：对照组（Control组）、模型组（Model组）、CHR低剂量组（CHR-L组）、CHR高剂量组（CHR-H组），每组10只。通过含铜（1 g/kg）饲料、含铜（0.185%）水喂养12周构建WD铜负荷大鼠模型，铜离子（Cu）测定试剂盒检测肝铜、24 h尿铜水平；Y迷宫实验评估大鼠空间探索和记忆能力；HE染色法观察海马组织CA1区神经元形态学改变；透射电镜观察海马组织CA1区超微结构；免疫荧光法检测自噬标志蛋白LC3A/B的表达情况；Western Blot检测自噬相关蛋白LC3A/B、Beclin-1、p62以及p-AMPK、p-mTOR的表达量。结果 与Control组比较，Model组中肝铜及24 h尿铜水平增加（P<0.01）；空间探索和记忆能力明显减弱（P<0.01）;CA1区海马神经元出现损伤；自噬小体数量增多；LC3A/B荧光表达增高；LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1及p-AMPK表达量升高（P<0.01）,p62、p-mTOR表达量降低（P<0.01）。经CHR不同剂量干预后，进一步降低肝铜水平、提高24 h尿铜水平（P<0.01）；改善空间探索和记忆能力（P<0.01,P<0.05）；缓解海马神经元损伤情况；减少自噬小体数量；降低LC3A/B荧光表达；下调LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1及p-AMPK蛋白表达量（P<0.01,P<0.05），上调p62、p-mTOR蛋白表达量（P<0.01,P<0.05）。结论 CHR对WD铜负荷大鼠模型具有神经保护作用，其机制可能与调控AMPK/mTOR信号通路抑制自噬的过度激活有关。

• 单位
  安徽中医药大学; 第一临床医学院; 安徽中医药大学第一附属医院